La plus répandue des techniques d'amplification génique est bien sur la PCR (Polymerase Chain Reaction). Son principal inconvénient est de faire appel à des cycles thermiques, ce qui nécessite un équipement spécifique (thermocycleur) pouvant être onéreux en terme d'investissement ou d'utilisation. Les techniques isothermes d'amplification (NASBA, SDA…) ne présentent pas cette inconvénient mais la complexité méthodologique concernant la phase de dénaturation limite souvent leur utilisation. Récemment une équipe américaine a mis au point une nouvelle technique isotherme simplifiant cette étape. Son originalité repose sur l'utilisation de l'hélicase, l'enzyme séparant naturellement les brins d'ADN au cours du processus de réplication. L'HDA peut être résumée par un schéma réactionnel simple en 4 étapes : - Séparation des 2 brins de l'ADNn par l'hélicase.
- Hybridations des amorces.
- Extension des amorces par l'ADN polymérase.
- Séparation des 2 brins de l'ADNn par l'hélicase et démarrage d'un nouveau cycle.
Cette technique semble donc promise à un bel avenir car elle pourrait être automatisée sur des équipements légers et peu coûteux. Elle est toutefois en phase de développement et ne permet pas actuellement l'amplification de séquences d'ADN aussi longues qu'en PCR.
EMBO reports – 08/2004
